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菌株编号

SHBCC D25047

其他编号

Y190

中文名称

Y190酿酒酵母SHBCC D25047

拉丁名

Saccharomyces cerevisiae Y190

模式菌株

非模式菌株

主要用途

科研

具体用途

Y190菌株是GAL4系统酵母双杂实验用菌株，MATa型。

生物危害程度

四类

培养基名称

YPD琼脂培养基

培养基成分

Peptone（胨） 10.0g，Yeast Extract（酵母浸出粉） 5.0g，Dextrose（葡萄糖） 20.0g，Agar(琼脂) 14.0g，蒸馏水 1000ml，pH6.0±0.2 （25℃）

培养温度

28℃

需氧类型

好氧

保存方法

4-10度

提供形式

冻干粉

备注

基因型：MATa, ura3-52, his3-200, ade2-101, lys2-801, trp1-901, leu2-3, 112, gal4Δ, gal80Δ, cyhr2, LYS2 : : GAL1UAS-HIS3TATA-HIS3, MEL1 URA3 : : GAL1UAS-GAL1TATA-lacZ

Y190菌株是GAL4系统酵母双杂实验用菌株，MATa型，可直接转化质粒或与MATα型酵母菌株Y187通过mating操作进行蛋白互作验证或筛库试验。Transformation marker为: trp1，leu2，cyh2；报告基因为： lacZ，HIS3，MEL1。Y190-GAL4酵母双杂系统需要两种质粒配套使用：(pGB和pACT2)或（pGBKT7和pGADT7）。质粒pGB由pGBKT7改造而来，筛选标志为TRP1，用于表达DNA-BD(来自酵母转录因子GAL4N端1~ 174位氨基酸)与目标蛋白(Bait)的融合蛋白；质粒pACT2与pGADT7的结构和功能类似，筛选标志为LEU，用于表达AD(GAL4 C端768~881位氨基酸)与目标蛋白 (Prey)的融合蛋白。GAL4系统原理：一个完整的酵母转录因子GAL4可分为功能上相互独立的两个结构域：位于N端1~174位氨基酸区段的DNA结合域 (DNA-BD)和位于C端768~881位氨基酸区段的转录激活域(AD)。DNA-BD能够识别GAL4-responsive gene的上游激活序列UAS，并与之结合。而AD可以启动UAS下游的基因进行转录。BD和AD单独存在不能激活转录，但当二者接近时，则呈现完整的GAL4活性，使含有UAS的启动子下游基因转录表达。正常条件下，BD不与AD结合，将要检测的蛋白质分别与BD和AD融合，形成 bait融合蛋白(bait –BD)和 prey融合蛋白 (prey-AD)，如果 bait和 prey发生相互作用，就会促使 BD和 AD的相互接近，形成完整的GAL4，从而激活报告基因的转录。

服务费

500